As lâminas hematológicas devem ser observadas, inicialmente, em pequeno aumento (10X) para uma avaliação geral da distribuição das células e da qualidade da lâmina. Selecione uma área onde as hemácias estejam distribuídas uniformemente, sem sobreposições e proceda ao estudo morfológico com objetiva de 40X procurando células anormais, estimando a quantidade e a morfologia das plaquetas e identificando a presença de macroplaquetas ou de grumos plaquetários. Use a objetiva de 100x para o estudo de detalhes como granulações citoplasmáticas, ponteado basófilo, presença de nucléolos etc.
A identificação dos leucócitos ou contagem diferencial deve ser iniciada em pequeno aumento (10X), observando-se a distribuição dos tipos celulares e a presença de grumos ou grupos celulares. A contagem diferencial deve ser feita com aumento intermediário (40X), usando-se o maior aumento (100X) para o exame de detalhes intracelulares ou para procura de parasitas.
A contagem deve ser realizada no corpo da lâmina, evitando-se as áreas inicial e final do esfregaço. As quantidades relativas dos cinco grupos principais de leucócitos, neutrófilos, eosinófilos, basófilos, linfócitos e monócitos devem ser anotadas. Os valores absolutos devem ser calculados usando-se o número total de leucócitos. Os eritroblastos, quando presentes, não devem ser incluídos na contagem diferencial. Sua quantidade deve ser expressa em número de eritroblastos por 100 leucócitos.
Principais causas de erro (OMS / CLSI / ICSH).
Na preparação da lâmina. | Provável causa |
Esfregaço irregular com falhas, riscos e cauda muito longa. | Borda da extensora suja ou irregular, lâmina suja (poeira). |
Esfregaço apresentando bolhas ou pequenos "buracos" | Lâmina suja com gordura. |
Distribuição irregular de leucócitos, especialmente na cauda. | Técnica de extensão deficiente. |
Esfregaço muito curto e muito espesso. | Ângulo da extensora incorreto. |
Esfregaço longo demais, até o final da lâmina. | Quantidade excessiva de sangue. |
Esfregaço muito fino | Quantidade pequena de sangue |
Esfregaço sem bordas | Lâmina extensora muito larga. |
Alterações morfológicas características de degeneração celular | Demora na fixação, tempo de fixação inadequado ou metanol contaminado com água. |
Na coloração | Provável causa |
Coloração muito azul | Esfregaço muito espesso. Tempo de coloração inadequado. pH do tampão muito alto. Corante de má qualidade. Corante exposto à luz. |
Coloração muito vermelha/rosa | Exposição excessiva ao tampão. pH do tampão baixo. |
Preparação descorada | Tempo de coloração muito curto. Lavagem excessiva. |
Precipitação de corante | Evaporação excessiva do corante. Falta de filtração. Lâminas sujas. |
Fundo azulado | Fixação inadequada. Armazenamento longo antes da coloração. Amostra com heparina. |
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